Flowcytometrie is een diagnostische en onderzoekstechniek die al vele jaren bekend is en veel wordt gebruikt in de oncologie. Met flowcytometrie kunnen de cellen die een suspensie vormen in een laminaire of gestratificeerde vloeistofstroom worden onderzocht met een apparaat dat een flowcytometer wordt genoemd. Wat zijn de indicaties voor flowcytometrie en hoe wordt dit gedaan?
Flowcytometrie wordt gebruikt bij de diagnose van hematologische neoplasma's omdat het vloeibare tumoren zijn, maar het is slechts een aanvullende methode. Het is echter de moeite waard eraan te denken dat er één kanker is die alleen met deze methode kan worden vastgesteld. Dit is chronische lymfatische leukemie.
Bij andere neoplastische ziekten wordt flowcytometrie gebruikt als een diagnostisch hulpmiddel, aangezien het zeer belangrijke kenmerken van neoplastische cellen vertoont. Deze methode wordt ook gebruikt om de effectiviteit van de toegepaste behandeling te beoordelen.
Flowcytometrie - wat laat het zien?
De vloeistofstroom die de testdeeltjes bevat, wordt met een constante snelheid (100-2000 deeltjes per seconde) door het meetgebied van de cytometer geleid. Hier analyseren optische methoden vormen, afmetingen, interne structuur van cellen en hun inhoud, bijvoorbeeld DNA. Alle cellen zijn optisch gelabeld.
De metingen zijn gebaseerd op de verstrooiingseigenschappen van laserlicht door individuele cellen of hun componenten (kernen, chromosomen, mitochondria) of de fluorescentie die erdoor wordt opgewekt.
Optische signalen worden omgezet in elektrische signalen, die na analyse grafisch worden weergegeven als mono- of biparametrische verdelingen.
De cytometer maakt ook scheiding van deeltjes mogelijk na het verlaten van de meetzone. Men kan zeggen dat het apparaat cellen rangschikt (scheidt) met dezelfde samenstellende elementen (preparatieve sortering) of specifieke celtypen extraheert (analytische sortering).
Flowcytometrie maakt de studie mogelijk van populatie-eigenschappen van cellen, analyse van cellulaire componenten (vooral zoals nucleïnezuren, eiwitten, oppervlakte- en celantigenen), enzymatische activiteit, membraanpotentiaal, mitochondriale activiteit, intracellulaire pH, ionentransport en membraanfluïditeit.
Flowcytometrie - toepassing
De flowcytometrie die bij diagnostiek wordt gebruikt, maakt het mogelijk om het fenotype van neoplastische cellen en de expressie van individuele eiwitten te bepalen. Om dit te bereiken worden gelabelde fluorescerende antilichamen gebruikt die op een karakteristieke manier binden aan antigenen op het oppervlak van het celmembraan. Dankzij dit is het mogelijk om de mate van hun differentiatie, oorsprong, prognostische en therapeutische markers te bepalen, die de beslissing over verdere diagnostische en therapeutische procedures vergemakkelijken.
Een andere toepassing voor flowcytometrie is het monitoren van de effectiviteit van de toegepaste behandeling door de zogenaamde "restziekte", het percentage cellen met tumorachtige fenotypes dat overblijft na behandeling.
Flowcytometrie vergemakkelijkt ook onderzoek naar kankerziekten. Dankzij deze methode is het mogelijk om bijvoorbeeld naar receptoren te zoeken die zich op het oppervlak van neoplastische cellen bevinden en die het doelwit van de behandeling kunnen worden.
De methode maakt het mogelijk om de activiteit van eiwitten in de cel te evalueren. Het is ook mogelijk om de celcyclus te evalueren, bijvoorbeeld door de hoeveelheid DNA in de cel te bepalen.
Tijdens het proliferatieproces doorloopt een cel de celcyclus door fasen waarin het de hoeveelheid DNA verdubbelt. Door deze hoeveelheid te bepalen, is het mogelijk om aan te geven in welke fase de cellen zich bevinden, of ze prolifereren of niet, of dat ze apoptose krijgen. Met andere woorden, met behulp van flowcytometrie kun je erachter komen of de cellen zich voorbereiden op apoptose, het geprogrammeerde doodsproces.
Flowcytometrie - de toekomst
Flowcytometrie is al tientallen jaren bekend en wordt in de geneeskunde gebruikt. Het wordt echter voortdurend verbeterd en creëert nieuwe diagnostische en onderzoeksmogelijkheden. In de eerste periode dat deze methode werd gebruikt, was het alleen mogelijk om de grootte en mate van granulariteit van cellen te bepalen.
Het gebruik van laserlicht in flowcytometrie-apparaten stelt u in staat om bepaalde fluorescerende markeringen te exciteren en vervolgens hun emissie te evalueren. Moderne cytometers laten een aanzienlijke toename toe van het aantal markers dat tegelijkertijd wordt beoordeeld, wat zich zeker vertaalt in een toename van de gevoeligheid van deze methode.
Daarom wordt het niet alleen gebruikt bij de diagnose van neoplastische ziekten, maar ook om de effectiviteit van de behandeling te beoordelen.
Over de auteur
Lees meer artikelen van deze auteur
