De antinucleaire antilichaamtest (ANA) wordt gebruikt als de primaire test om de toestand van auto-immuun bindweefselaandoeningen te beoordelen. Dit zijn aandoeningen die veel weefsels en organen in het hele lichaam aantasten. Wat laten de testresultaten zien? Wat zijn ANA's? Welke ziekten kunnen ANA worden opgespoord?
Inhoudsopgave:
- ANA-test - wat zijn antinucleaire antilichamen?
- ANA-test - gebruik bij diagnostiek
- ANA-test - de aanwezigheid van ANA in het bloed van gezonde mensen
- ANA-test - wat is een naam?
- ANA-test - wanneer moet een ANA-test worden uitgevoerd?
De afkorting ANA komt van de Engelse naam anti-nucleaire antilichamen, wat zich in het Pools vertaalt als "antinucleaire antilichamen". Deze moleculen behoren tot eiwitten die auto-antilichamen worden genoemd. Dit zijn eiwitten die het lichaam aanvallen dat ze aanmaakt.
ANA-test - wat zijn antinucleaire antilichamen?
Het menselijk lichaam heeft veel afweermechanismen tegen ziekteverwekkers. Een daarvan is humorale immuniteit. Het is gebaseerd op de productie van beschermende antilichamen. Bij gezonde mensen produceert het immuunsysteem antilichamen tegen vreemde antigenen.
Soms zijn er echter situaties waarin autoantigenen worden aangemaakt, die gericht zijn tegen de eiwitten in ons eigen lichaam. Dit proces is essentieel voor het ontstaan van auto-immuunziekten.
De antinucleaire antilichamen vallen eiwitten en andere moleculen aan die de kern vormen.
Er zijn veel verschillende soorten ANA. De afbraak van deze antilichamen is gebaseerd op de soorten nucleaire componenten waartegen deze moleculen zijn gericht. Afhankelijk van het type kunnen ANA's binden aan zowel afzonderlijke eiwitten als complexe complexen.
Er zijn bijvoorbeeld antistoffen tegen nucleaire kanalen en histonen, dat zijn moleculen waarop DNA is gewikkeld.
Aanvallende ANA's kunnen worden onderscheiden:
- JICHT
- histonen
- ribonucleoproteïnen
- Nucleair RNA
- niet-histone eiwitten
Alle genoemde componenten zijn kenmerkend voor de celkern.
ANA's zijn bij allerlei ziekten in het bloed aanwezig. Dit omvat auto-immuunziekten, kanker en sommige soorten infecties. Hierdoor kunnen antinucleaire antilichamen worden gebruikt bij de diagnose van bepaalde ziektetoestanden.
ANA-test - gebruik bij diagnostiek
De ANA-test wordt gebruikt om antinucleaire auto-antilichamen in het bloed van de patiënt te detecteren. Dit onderzoek is belangrijk voor de diagnose van ziekten zoals:
- systemische lupus erythematosus
- Syndroom van Sjogren
- sclerodermie
- polymyositis
- dermatomyositis
- auto-immuunhepatitis
- door geneesmiddelreactie geïnduceerd rollen
Een positief ANA-testresultaat is alleen diagnostisch als de klinische symptomen dit bevestigen. Het testen van het niveau van antinucleaire antilichamen kan ook nuttig zijn bij het volgen van ziekteprogressie.
Typische tests die worden gebruikt om ANA te detecteren en te evalueren zijn:
- indirecte immunofluorescentie
- ELISA-enzym immunosorbent test
De methode van indirecte immunofluorescentie
Indirecte immunofluorescentie is een van de meest gebruikte ANA-tests. Meestal gebruikt deze test Hep-2-cellen. Ze worden in de vorm van een dunne laag op objectglaasjes aangebracht. Vervolgens wordt het van de patiënt verzamelde serum erop geplaatst en samen met Hep-2-cellen geïncubeerd.
Als ANA's in het genomen monster aanwezig zijn, worden ze na de incubatieperiode gedetecteerd in een vorm die is geassocieerd met de antigenen in de celkern. Dit kan worden gezien door een fluorescerend label toe te voegen dat aan de antilichamen bindt.
Hiervoor worden meestal fluoresceïne of rhodopsine B isothiocyanaat (FITC) of rodopsine B. Een molecuul fluoresceert wanneer een lichtstraal van een bepaalde golflengte eraan wordt blootgesteld. Een microscoop wordt gebruikt om de fluorescentie te observeren en te evalueren.
Verschillende patronen van fluorescentie kunnen worden waargenomen in HEp-2-cellen, afhankelijk van het type antilichaam dat aanwezig is in menselijk serum en de antigeenlokalisatie. Hun analyse maakt het mogelijk om de soorten antilichamen te bepalen die in het monster aanwezig zijn.
Antilichaamspiegels worden bepaald door seriële verdunningen van bloedserum uit te voeren. Een ANA-test wordt als positief beschouwd als fluorescentie wordt waargenomen bij een titer van 1: 40/1: 80. Een resultaat boven 1: 160 is echter van significant diagnostisch belang.
Enzym-immunoassay (ELISA)
De enzym-immunoassay (ELISA) gebruikt microtiterplaten met antigenen om ANA te detecteren. Elk putje van de plaat is bekleed met een of meer antigenen. Dit dient om specifieke antilichamen op te sporen.
Het bloedserum wordt in de putjes van de plaat geïncubeerd en vervolgens uitgewassen. Als er antinucleaire antilichamen in het monster aanwezig waren, blijven ze na het wassen aan de juiste antigenen op de microtiterplaat gebonden.
In de volgende stap van de test wordt een tweede enzymgebonden antilichaam aan het putje van de plaat toegevoegd. De enzymatische reactie zorgt ervoor dat de oplossing van kleur verandert.
Het kleurverschil is evenredig met de hoeveelheid antigeen-gebonden antilichamen in het putje van de plaat. De kleur van de verkregen oplossing kan worden bepaald door de spectrofotometrische methode, d.w.z. door de intensiteit te meten van de lichtbundel die door de oplossing wordt doorgelaten.
ANA-test - de aanwezigheid van ANA in het bloed van gezonde mensen
Geschat wordt dat in 5% van de menselijke populatie antinucleaire antilichamen in het bloed aanwezig zijn in een concentratie die als diagnostisch relevant wordt beschouwd, ongeacht de aanwezigheid van de ziektetoestand.
Naarmate de frequentie van ANA toeneemt met de leeftijd, test maar liefst 10-37% van de gezonde mensen ouder dan 65 jaar positief op de aanwezigheid van ANA. Dergelijke gevallen komen vaker voor bij vrouwen dan bij mannen.
ANA-test - wat is een naam?
De karakteristieke waarde voor de ANA-test is de titer. Het geeft de verdunningsgraad van het serum aan waarbij de antinucleaire antilichamen niet meer detecteerbaar zijn. Hoe hoger de concentratie ANA in het bloed, hoe hoger de titer die aanwezig is in de testresultaten.
Antinucleaire antilichaamspecificiteitstest wordt aanbevolen als de titer hoger is dan 1: 160. Deze aanvullende tests moeten worden uitgevoerd in combinatie met de analyse van de klinische geschiedenis en het lichamelijk onderzoek van de patiënt. Het doel van deze stappen is om auto-immuunziekten te diagnosticeren of uit te sluiten.
Opgemerkt moet echter worden dat een dergelijk resultaat optreedt bij 5% van de patiënten, ongeacht de ziektetoestand. Het testresultaat is alleen diagnostisch als er andere ziektesymptomen zijn.
Een negatief ANA-testresultaat geeft aan dat het onwaarschijnlijk is dat een patiënt lupus of een andere auto-immuunziekte heeft.
ANA-test - wanneer moet een ANA-test worden uitgevoerd?
De ANA-test wordt besteld wanneer de symptomen van de patiënt duiden op een systemische auto-immuunziekte. Ze kunnen erg niet voor de hand liggend en niet-specifiek zijn en kunnen in de loop van de tijd veranderen.
Voorbeelden van symptomen zijn:
- Lichte koorts
- Aanhoudende vermoeidheid
- Artritis-achtige pijn
- Een rode uitslag
- Gevoeligheid van de huid voor licht
- Haaruitval
- Pijn in de spieren
- Gevoelloosheid of tintelingen in de handen of voeten
- Ontsteking van organen en weefsels (nieren, longen, hart, hartwand, centraal zenuwstelsel of bloedvaten)
Literatuur:
- https://labtestsonline.org/tests/antinuclear-antibody-ana
- "Medische onderwerpkoppen". Nationale bibliotheek van geneeskunde. 12 februari 2013.
- "De antinucleaire antilichaamtest: wat het betekent". Lupus Stichting van Amerika. Ontvangen 7 juni 2013
- Kumar, Y; Bhatia, A; Minz, RW (2 januari 2009). "Antinucleaire antilichamen en hun detectiemethoden bij de diagnose van bindweefselaandoeningen: een reis opnieuw bezocht". Diagnostische pathologie
- www.autopróbciala.info
- Kavanaugh, Arthur, Tomar, Russell, Reveille, John, Solomon, Daniel H. en anderen. Richtlijnen voor klinisch gebruik van de antinucleaire antilichaamtest en tests voor specifieke auto-antilichamen tegen nucleaire antigenen. Archives of Pathology & Laboratory Medicine. 124 (1), blz. 71-81, januari 2000
Lees meer van deze auteur